您的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 做細(xì)胞培養(yǎng)為什么一定要恒溫二氧化碳培養(yǎng)箱?
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恒溫二氧化碳培養(yǎng)箱主要通過(guò)模擬生物體的溫度,濕度,PH值等進(jìn)行生物細(xì)胞的培養(yǎng),是實(shí)驗(yàn)室做細(xì)胞培養(yǎng)*的一款培養(yǎng)箱。二氧化碳培養(yǎng)箱滅菌一種是高溫滅菌,另一種是紫外線(xiàn)滅菌,使用性比較高的是紫外線(xiàn)滅菌的,里面有紫外線(xiàn)燈管。一般推薦選擇紫外線(xiàn)滅菌。
人們發(fā)現(xiàn)由于空氣中的二氧化碳濃度很低,如果細(xì)胞不在恒溫二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)液中的HCO3-會(huì)被耗盡,這樣會(huì)影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。所以大部分動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),還是需要二氧化碳培養(yǎng)箱。
一般細(xì)胞培養(yǎng)液的pH在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種生理pH緩沖系統(tǒng)(它是人體血液中*-重要的pH緩沖系統(tǒng)),大多數(shù)培養(yǎng)液用它來(lái)保持穩(wěn)定的pH。用粉末配制培養(yǎng)液時(shí),常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。
細(xì)胞培養(yǎng)液中常附加其他的pH緩沖系統(tǒng),比如HEPES緩沖系統(tǒng),來(lái)增加pH緩沖能力。HEPES在pH7.2-7.4之間有很強(qiáng)的緩沖能力,當(dāng)透氣的培養(yǎng)器皿被拿到二氧化碳培養(yǎng)箱外面的時(shí)候,由于空氣中二氧化碳濃度很低,培養(yǎng)液中碳酸鹽緩沖系統(tǒng)就會(huì)失去效果,這時(shí)候HEPES緩沖系統(tǒng)就能繼續(xù)保持pH的穩(wěn)定。
對(duì)大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言,為了維持穩(wěn)定的pH,培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣,以便于氣體的交換。